Lang Histotechnik

Praxislehrbuch für die Biomedizinische Analytik
2006
ISBN: 978-3-211-33142-2
Verlag: Springer Vienna
Format: PDF
Kopierschutz: 1 - PDF Watermark

E-Book, Deutsch, 427 Seiten

Dieses Buch stellt erstmals umfassend die unterschiedlichen Techniken dar, die in einem histodiagnostischen Labor angewandt werden. Neben Basisthemen wie Fixierung, Gewebeprocessing und Färbung, behandelt es praxisrelevant und ausführlich die Grundlagen von Immunhistochemie und in-situ-Hybridisierung. Zusätzlich erläutert es Qualitätssicherung und Arbeitssicherheit. Die Autorin berichtet sehr strukturiert und leicht verständlich aus ihrer langjährigen Erfahrung. Zahlreiche Abbildungen illustrieren die moderne Instrumentation im Labor. Das Praxislehrbuch deckt die Anforderungen der Fachhochschule bzw. Akademie für Biomedizinische Analytik ab.

Gudrun Lang ist Biomedizinische Analytikerin (MTA) und seit Jahren in einem Histologischen Labor in einem großen Krankenhaus tätig. Sie hat ihr fachliches Wissen und ihre Erfahrungen in diesem Buch gesammelt und gibt sie KollegInnen und BerufsanfängerInnen praxisnah weiter.

Autoren/Hrsg.

Lang, Gudrun

Inhaltsverzeichnis

1;Geleitwort;5
2;Vorwort;7
3;Inhaltsverzeichnis;9
4;Aufgaben der histologischen Technik / Pathologie;10
5;Ablauf in einem modernen, histodiagnostischen Labor;12
6;Biochemie;15
6.1;A. Aufbau der Zelle;16
6.1.1;1. Schematische Darstellung einer Epithelzelle;16
6.1.2;2. Zellkern (Nukleus);17
6.1.3;3. Nukleolus;17
6.1.4;4. Cytoplasma;17
6.1.5;5. Endoplasmatisches Reticulum (ER);17
6.1.6;6. Ribosomen;18
6.1.7;7. Mitchondrien;18
6.1.8;8. Lysosome;18
6.1.9;9. Golgi-Apparat;18
6.1.10;10. Zentriol;19
6.1.11;11. Paraplasma;19
6.1.12;12. Zellmembran;19
6.1.13;13. Mikrovilli;19
6.1.14;14. Gewebe;20
6.1.15;15. Interzellular-Substanz;20
6.2;B. Bausteine;20
6.2.1;1. Wasser;20
6.2.2;2. Salze;21
6.2.3;3. Proteine;21
6.2.3.1;3.1. Aminosäuren;22
6.2.3.2;3.2. Proteinstruktur;23
6.2.3.3;3.3. Hydratation;24
6.2.3.4;3.4. Denaturierung;24
6.2.3.5;3.5. Proteide;24
6.2.3.6;3.6. Enzyme;25
6.2.4;4. Kohlenhydrate;26
6.2.4.1;4.1. Einfachzucker;27
6.2.4.2;4.2. Zweifachzucker;27
6.2.4.3;4.3. Mehrfachzucker;27
6.2.4.3.1;4.3.1. Glykogen;28
6.2.4.3.2;4.3.2. Glykokonjugate (Schleimstoffe);28
6.2.4.3.3;4.3.3. Glykokalix;31
6.2.4.3.4;4.3.4. Basalmembran;31
6.2.5;5. Lipide;31
6.2.5.1;5.1. Triglyceride;32
6.2.5.2;5.2. Lipoide;33
6.2.5.2.1;5.2.1. Phosphatide;33
6.2.5.2.2;5.2.2. Ganglioside;33
6.2.5.2.3;5.2.3. Sphingolipide;33
6.2.5.2.4;5.2.4. Steroide;33
6.2.6;6. Nukleinsäuren;34
6.3;C. Zusammenfassung;35
7;Untersuchungsmaterial;36
7.1;A. Gewinnungsart;37
7.2;B. Vorbehandlung;39
7.2.1;1. Fixiertes Gewebe;39
7.2.2;2. Natives, unfixiertes Material;39
7.2.2.1;2.1. Intraoperative Schnellschnittuntersuchung;40
7.2.2.2;2.2. Natives Material zur direkten mikroskopischen Untersuchung;41
7.2.2.3;2.3. Zellsuspensionen (Punktionen);42
7.3;C. Vitalzustand;42
7.3.1;1. Tote Zellen, totes Gewebe;42
7.3.2;2. Lebende Zellen;42
7.4;D. Einsenderichtlinien;43
7.5;E. Faktoren der Vorbehandlung;44
7.5.1;1. Anmeldung im Labor für spezielle Fragestellungen – Ansprechpartner;44
7.5.2;2. Untersuchungsart – fixiert, nativ;44
7.5.3;3. Gewünschte Vorbehandlung;44
7.5.4;4. Art des Fixiermittels – Formalin, Alkohol, Glutaraldehyd;44
7.5.5;5. Menge des Fixiermittels – Einsendegefäße;44
7.5.6;6. Identifikation der Probe – Etiketten, Einsendeschein;45
7.5.7;7. Information zu Klinik und Operation, Orientierung – Einsendeschein;45
7.6;F. Sonstiges Probenmaterial;46
7.6.1;1. Obduktionen;46
7.6.2;2. Probenmaterial von Tieren;47
7.6.3;3. Probenmaterial von Pflanzen;47
8;Fixierung;48
8.1;A. Allgemeines;49
8.2;B. Fixierung der Gewebe-Bausteine;52
8.3;C. Fixiermittel;54
8.4;D. Andere Formen der Fixierung;71
9;Verarbeitung von hartem Gewebe;75
9.1;A. Dekalzifikation – Entkalkung;77
9.1.1;1. Entkalkung durch Säure;77
9.1.2;2. Entkalkung durch Chelatbildung;78
9.1.3;3. Prüfung der Entkalkung;80
9.1.4;5. Beschleunigung der Entkalkung;81
9.1.5;8. Schneiden;82
9.1.6;9. Oberflächenentkalken;82
9.1.7;10. Färbung entkalkter Proben;82
9.1.8;11. Untersuchungsmaterial im Histodiagnostiklabor;83
9.2;B. Mazeration;84
9.3;C. Hartschnitttechnik – Hartschlifftechnik;85
9.3.1;1. Geräte zur Präparatherstellung;85
9.3.2;2. Beispiele für Knochenverarbeitung;86
9.3.3;3. Färbungen an unentkalkten Schliffpräparaten;87
9.3.3.1;3.1. Toluidinblau-Färbung;87
9.3.3.2;3.2. Masson-Goldner-Trichromfärbung (Bindegewebsfärbung);87
9.3.3.3;3.3. von Kossa - Färbung;87
9.3.3.4;3.4. Färbung nach Giemsa;88
9.3.3.5;3.5. Hämatoxylin-Eosin-Färbung;88
9.3.4;4. Färbungen an Methacrylatschnitten von unentkalkten Knochenbiopsien;88
9.3.5;5. Fluoreszenz-Markierung in Knochen;88
9.3.6;6. Autoradiografie;89
9.3.7;7. Kontaktradiografie;89
9.3.8;8. Histomorphometrische Methoden am unentkalkten Knochen;89
9.4;D Makroskopische Begutachtung – Vom Fläschchen in die Kassette;91
10;Einbettungsprozess;95
10.1;A. Paraffinwachseinbettung;97
10.1.1;1. Nachbehandlung nach Formalin-Fixierung;97
10.1.2;2. Beispiel eines Einbettungsprotokolls;97
10.1.3;3. Faktoren des Einbettungsprozesses;98
10.1.3.1;3.1. Prinzip;98
10.1.3.2;3.2. Gewebe;98
10.1.3.3;3.3. Reagenzien;98
10.1.4;3.4. Prozessbedingungen;99
10.1.5;4. Arbeitsschritte;100
10.1.6;5. Automation;103
10.1.7;6. Ausgießen, Einblocken (Embedding);106
10.1.8;7. Tissuearray (Multigewebeblock);109
10.2;B. Gelatine-Einbettung;111
10.3;C. Agar-Einbettung;112
10.4;D. Celloidin-Einbettung (Nitrocellulose);113
10.5;E. Polyethylenglykol-Einbettung (PEG);114
10.6;F. Polyesterwachs-Einbettung;115
10.7;G. Kunststoff-Einbettung;116
10.8;H. Übersicht - Processing-Reagenzien;128
11;Mikrotomie;132
11.1;A. Einbettmedien - Schnittdicken;133
11.2;B. Mikrotom;134
11.3;C. Mikrotommesser;141
11.4;D. Schneidetechnik;146
11.5;E. Anhaften der Schnitte am Objektträger;161
11.6;F. Laser Capture Microdissection (LCM);166
12;Histologische Färbung;168
12.1;A. Geschichtliches;170
12.2;B. Farbstoffe;171
12.3;C. Färbetheorie;179
12.4;D. Vorbehandlung;188
12.5;E. Färbeprotokolle;189
12.6;F. Übersichtsfärbung: Hämatoxylin – Eosin – Färbung;192
12.7;G. Spezialfärbungen;198
12.8;H. Bindegewebe- und Stützgewebe-Darstellung;204
12.9;K. Amyloid-Darstellung;222
12.10;M. Mikroorganismen-Darstellung;230
12.11;N. Darstellung neurologischer Strukturen;233
12.12;O. Nukleinsäuren-Darstellung;236
12.13;P. Darstellung von biogenen Aminen;237
12.14;Q. Darstellung funktioneller Gruppen;238
12.15;S. Nachbehandlung der Schnitte;239
12.16;T. Färbeautomaten;242
12.17;U. Färbung in der Elektronenmikroskopie;244
13;Enzymhistochemie;246
13.1;A. Enzyme;247
13.2;B. Indikationen;248
13.3;C. Fixierung;248
13.4;D. Nachweisprinzip;249
13.5;E. Phosphatasen;253
13.6;F. Esterasen;255
13.7;G. Oxidoreductasen;258
14;Immunhistochemie;266
14.1;A. Prinzip;267
14.2;B. Anwendung der Immunhistochemie;268
14.3;C. Antikörper;269
14.4;D. Begriffe;277
14.5;E. Fixierung, Processing, Schneiden in der Immunhistologie;279
14.6;F. Antigen-Demaskierung;281
14.7;G. Methoden;284
14.8;H. Amplifikationsmethoden;292
14.9;K. Bearbeitung von zytologischem Material und Gefrierschnitten;299
14.10;L. Protokoll-Beispiel für LSAB-Methode;300
14.11;M. Automation;301
15;In Situ Hybridisierung;304
15.1;A. Anwendungen;305
15.2;B. Prinzip;307
15.3;C. Ablauf;311
15.4;D. Automation;318
15.5;E. In-situ-PCR;319
15.6;F. Extraktion von Nukleinsäuren aus fixiertem Gewebe;319
15.7;G. Microarrays;321
15.8;H. Begriffe;324
16;Zellkultur;328
16.1;A. Technik;329
16.2;B. Anwendungsbeispiele;337
16.3;C. Gewebe- und Organkulturen;339
16.4;D. Begriffe;340
17;Mikrowellentechnik;342
17.1;A. Mikrowellen-Physik;343
17.2;B. Faktoren der Energieaufnahme;344
17.3;D. Mikrowellenherde;346
17.4;E. Praktisches Arbeiten mit Mikrowellen;348
17.5;F. Anwendungen;349
18;Mikroskopie;353
18.1;A. Hellfeldmikroskop;354
18.2;B. Dunkelfeldmikroskop;355
18.3;C. Phasenkontrastmikroskop;355
18.4;D. Interferenzkontrastmikroskop;355
18.5;E. Polarisationsmikroskop;356
18.6;F. Fluoreszenzmikroskop;356
18.7;G. Konfokales Raster-Lasermikroskop;356
18.8;H. Stereomikroskop;357
18.9;I. Elektronenmikroskop;357
18.10;J. Digitale Bildgebung;361
19;Qualitätssicherung im Labor;363
19.1;A. Projekt;364
19.2;B. Produkt;367
19.3;C. Prozesse;369
19.4;D. Projektteam;370
19.5;E. Dokumente;373
19.6;F. Faktor Mensch;374
19.7;G. Begriffe;375
20;Sicherheit im histologischen Labor;380
20.1;A. Chemische Arbeitsstoffe;382
20.2;B. Biologische Arbeitsstoffe;394
20.3;C. Wohlfühlfaktor am Arbeitsplatz;396
20.4;D. Gesetzliche Richtlinien;397
20.5;E. Aufstellung von Chemikalien im Histolabor;399
21;Geschichte der histologischen Technik;415
21.1;A. Zeittabelle;416
22;Quellen;423
23;Abkürzungen;420
24;Bildnachweis;431
25;Sachverzeichnis;432